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                          客戶咨詢熱線:
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                          組織研磨儀

                          簡要描述:補充:如果需要提取的樣品比較多(比如1g),研磨好的樣品在后續的提取中,需要轉移到大的epp管中,研磨時可以加入較少的抽提液,研磨完畢按照1g樣品10ml提取液補充抽提液,進行后續的操作。

                          • 產品型號:GT100
                          • 廠商性質:生產廠家
                          • 更新時間:2023-04-23
                          • 訪  問  量:2589
                          詳情介紹
                            組織研磨儀可在1-3分鐘內對硬性、軟性、彈性等樣品進行快速有效的干磨或濕磨,亦可達到對粉體及混濁液混合、均相化的目的,還可以進行低溫液氮冷凍研磨,也可以進行生物細胞破碎和DNA/RNA提取。組織研磨機可研磨的樣品種類包括:植物組織、動物組織、細胞、細菌、芽孢和酵母等。
                            組織研磨儀采用上下垂直高速振蕩模式,可快速促進細胞快速破碎、細胞裂解、組織均勻,使樣品研磨更加均勻;對樣品研磨的重復性更好,樣品間無交叉污染,節省時間和人工成本,是一種效率很高的樣品預處理設備。其還具有冷凍組件,可滿足用戶研磨和保存溫度敏感樣品的需求。

                          組織研磨儀

                           
                            一、工作原理
                            組織研磨儀本質是二維振動球磨儀,是通過振動的方式來實現對樣品的粉碎研磨。其工作區域安裝有兩個可高頻次振動(每分鐘可達1500次)的搖臂,搖臂形似機械手,可放置球磨罐或研磨適配器。
                            設備工作時,兩只搖臂作"∞"形運動,即水平擺動,其帶動球磨罐內部的研磨球,賦予其動能,研磨球在容器內進行高頻次、無規則的運動,實現對樣品的撞擊和擠壓,完成粉碎和研磨。
                           
                            二、組織研磨儀詳細的操作步驟如下:
                            1、在離心管中加入樣品、研磨球、裂解液(可?。?,蓋上蓋;
                            2、將裝好樣品的離心管放入適配器中;
                            3、將適配器及裝有樣品的離心管浸入液氮中進行預冷凍;
                            4、將適配器裝到主機上,鎖緊固定裝置;
                            5、觀賞防護罩,按需求設定好參數后,開始研磨;
                            6、等儀器*停止振動后關機,打開安全門,取出樣品;
                            7、儀器歸位。
                           
                            三、工藝技術:
                            1、平整度:
                            工件的平整度取決于磨盤的平整度。隨著加工領域的不斷深化及精度和效率要求越來越高:“WEIANDA”從鑄鐵盤、合成盤、銅盤、純錫盤、樹脂盤發展到金剛石盤,并通過各種方法把盤的平面訂修到佳達2um。
                            2、粗糙度:
                            表面粗糙度取決于磨料顆粒的大小、形狀和磨盤的材料, 以及工件材質及硬度。
                            3、粗磨:
                            利用較粗顆粒度的磨料在磨盤與工件面上磨削,進刀量大、效率高;但磨削面較粗,適用于磨削余量較多之工作。
                            4、中磨:
                            利用中度顆粒的磨料在磨盤與工件面上磨削,進刀量快、效率高,表面粗糙度適中,適合磨削量一般之工件。
                            5、精磨:
                            利用較細顆粒度的磨料在磨盤中與工件面上磨削,進刀量較小、表面光潔度好,磨削痕均勻而細。
                            6、軟拋光:
                            利用磨盤上加裝一個特殊材料拋光墊或拋光布,拋光料在拋光墊或拋光布之間運動,使工件比硬拋光更有超鏡子一樣的高光潔度。
                            7、硬拋光:
                            利用合成盤、銅盤、錫盤、樹脂盤等非常高精密度的基面加入微米級金剛石磨料,使工件表面變得既高精密平面度,又有像鏡子一樣的高光潔度。
                           
                            四、組織研磨儀的使用方法:
                            1、將儀器放置在干燥通風的環境中,插上電源,觀察儀器控制顯示器是否正常亮燈。打開儀器,測試控制按鈕是否能正常使用,儀器空載運行時是否有異響。
                            2、將適量樣品和研磨球放入球磨罐中,預留一定的研磨空間。初次研磨建議保持樣品和研磨球各占球磨罐容積的三分之一。
                            3、若需要預冷凍,可將裝有樣品的球磨罐放入液氮環境中冷卻3分鐘以上,然后再裝入儀器進行研磨。使用液氮進行預冷凍時,應做好防護措施,防止被凍.傷。
                            4、將球磨罐放入高通量組織球磨儀的夾具內,慢慢轉動轉輪,依靠自動定位的緊固裝置固定好球磨罐,蓋上蓋子。
                            5、在控制顯示器上設定好研磨儀的運行時間和擺動頻次,開始研磨。研磨完成后,轉動轉輪取下球磨罐。
                           
                            組織研磨儀可對硬性、中硬性和脆性樣品進行細粉碎和精細研磨,還適用于軟性、彈性、纖維質材料的研磨前處理。既可干磨,也可濕磨,還可進行冷凍低溫研磨,在農業、生物醫藥、食品、地質化工、環境、質檢、高??蒲械榷鄠€行業的實驗室都有廣泛應用。
                           
                            五、 實驗試劑:
                            1.CTAB抽提液:
                            2%(w/v)CTAB
                            100 mmol/L Tris-HCl(pH8.0)
                            20 mmol/L EDTA(pH8.0)
                            1.4 mol/L NaCl
                            抽提含多酚較多的植物材料時(比如木本植物),上述抽提液中可另加入2%的PVP(聚乙烯吡咯烷酮)。
                            抽提液于室溫保存,可在幾年內保持穩定。臨用之前向裝有上述抽提液的試管中加入約2%-3%(v/v)的β-巰基乙醇。
                            2、醋酸鈉:
                            3 mol/L NaAc
                            用冰乙酸調pH值至4.8-5.2。
                            3、TE溶液:
                            4、其它:
                            無水乙醇,異丙醇,75%乙醇,酚:氯仿:異戊醇(25:24:1),氯仿:異戊醇(24:1),β-巰基乙醇,重蒸水。
                           
                            六、 實驗步驟
                            1. 樣品研磨
                            1) 取1g的樣品放入2ml ep管中
                            2) 加入1-2粒5mm研磨珠
                            3) 加入1ml的CTAB 抽提液
                            4) 將加有樣品的ep管放入高通量組織研磨儀的適配器中,蓋好
                            5) 將研磨轉速調到1800,設定研磨時間為90秒(可根椐樣品的研磨的難易程度來調節,此數據是以銀杏落葉為樣本得出)
                            6) 啟動研磨儀對樣品進行研磨(根據不同的樣品,本身性質不同,需要對研磨頻率和研磨時間進行適當的調整)
                            2. DNA的粗提
                            1) 將研磨好的樣品取出于65℃水浴45min,中途間隔(輕柔)振蕩三次混勻
                            2) 冷卻后加入等體積氯仿:異戊醇(24:1),輕柔顛倒混勻使乳化10min
                            3) 7000g-8000g離心10min(18-20℃)
                            4) 吸取上清于另一干凈的離心管中
                            5) (根據需要可用氯仿:異戊醇如上法重復抽提一次,吸取上清)
                            6) 加入與上清液等體積(且已于-20℃預冷的異丙醇,顛倒混勻,約1至2分鐘后應有白色絮狀沉淀出現(若沒有,則加入上清液1/5至1/10體積的pH4.8-5.2的3M NaAc,混勻,于-20℃冰箱中沉淀30min)
                            7) 離心法沉淀DNA
                            8) 在75%乙醇中漂洗DNA數分鐘以上,用Tip頭吸干乙醇
                            9) 用1ml 75%乙醇再漂洗一次
                            10) 沉淀于室溫或64℃以下的恒溫箱中干燥片刻至剛出現半透明,不要過度干燥
                            11) 用50μlTE溶解沉淀,可用65℃水浴助溶,DNA粗提物可用于粗略PCR等。
                            3. DNA的純化
                            1) 向TE溶解的DNA粗提物中入4-10μl RNaseA(約40-100μg)
                            2) 于37℃酶解RNA 1hr或65℃酶解RNA 30min以上
                            3) 加入50μl酚:氯仿:異戊醇(25:24:1),輕輕顛倒混勻10min
                            4) 10000g以上常溫離心10min,吸取上清
                            5) 加入50μl仿氯:異戊醇(24:1)輕輕顛倒10min
                            6) 10000g以上常溫離心10min,吸取上清 (根據需要可重復用氯仿:異戊醇如上法再抽提1-2次,以充分去除蛋白和酚)
                            7) 向上清中加入1/5-1/10體積的pH4.8-5.2的3M NaAc,并加入2.5倍體積無水乙醇,于-20℃沉淀30min以上
                            8) 12000g、4℃低溫離心10min,吸干液體
                            9) 沉淀用75%乙醇漂洗二次
                            10) 沉淀于室溫或64℃以下恒溫箱中干燥片刻至剛開始出現半透明狀,勿過度干燥加入50μl重蒸水溶解DNA,可于65℃水浴助溶
                            11) 取5μl DNA電泳檢查DNA的質量
                            12) 100-500倍稀釋后于分光光度計上測定OD260及OD280,分析DNA的濃度和質量
                            13) 保存DNA于-20℃
                            補充:如果需要提取的樣品比較多(比如1g),研磨好的樣品在后續的提取中,需要轉移到大的epp管中,研磨時可以加入較少的抽提液,研磨完畢按照1g樣品10ml提取液補充抽提液,進行后續的操作。
                           
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